鲤病毒病原的感染性测定  

陈中元'， 2 ，刘 荭'，李正秋'，王 敏'，张奇亚'

 　(1 ．中国科学院水生生物研究所，淡水生态与生物技术国家重点实验室，湖北武汉 430072 ； 2 ．中国科学院研究生院，北京  )

　　摘要：为查明养殖鲤 (Cyprinus carpio) 突然大批发病死亡的原因，对鲤病样品进行了细胞攻毒、空斑测定、电镜观察，以及   鱼体感染等实验。先以患病鲤的组织匀浆液，经过滤后，分别接种到草鱼鳍条细胞 (GCF) 、鲤上皮瘤细胞 (EPC) 等 14 种   培养细胞中。利用倒置显微镜观察显示，在 1 ～ 2d 内，该病鱼组织匀浆液可使其中 9 种细胞出现典型的细胞病变。收   集出现病变的细胞液 ( 即病毒悬液 ) ，进一步进行病毒滴度检测、空斑测定和鱼体感染实验。结果显示，在 GCF 细胞上的   病毒滴度为 107 ． 3TCID50 ／ mL ；在 FHM ， TSB 和 CCD 等细胞中可产生直径 1 ～ 4mm 的圆形空斑，空斑的大小与宿主细胞   的种类和接种的病毒浓度有关。通过对感染细胞制备的超薄切片和病毒负染样品进行电镜观察，显示这是一类呈典型   子弹头样的弹状病毒颗粒。感染了病毒悬液的鲫和鲤先后在第 2 天和第 3 天开始出现病症，间隔 1 ～ 2d 后发病的鱼开   始死亡，至第 14 天，两种感染鱼的死亡率均达到 83 ． 3 ％。收集人工感染后濒死的鲫和鲤，分别制备组织匀浆液，回接感   染鱼类培养细胞， 24h 内能使其出现与原发病鲤组织匀浆液所引起的类似的细胞病变。因此证实患病鲤是由病毒病原 感染所致。

[ 中国水产科学， 2006 ， 13(4) ： 617 — 623] 

关键词：鲤；病毒；细胞培养；病毒感染；空斑实验  

中图分类号： S943 ． 116 ． 41

文献标识码： A 文章编号： 1005 — 8737 — (2006)04 — 0617 — 07