蟹源拟态弧菌外毒素生物学特性研究

李玉英，杜敏华，李槿年，余为一

南阳师范学院生命科学系，河南南阳 473061 ；安徽农业大学畜牧水产学院

摘要：对蟹源拟态弧菌 HX — 4 菌株外毒素的酶活性、溶血活性、细胞毒性和致死性等生物学特性进行了系统研究。采用固体硫酸铵盐析法和层析技术提取拟态弧菌 HX — 4 菌株外毒素，所得外毒素具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、溶血素等多种毒性酶活性、细胞毒性 (HEp — 2) 、肠毒性和致死性等生物学特性， TCIDso 为 0 ． 025ug ，对中华绒螯蟹的半数致死量 (LD50) 为 1 ． 40ug 。

关键词：中华绒螯蟹；拟态弧菌；外毒素；生物学特性

中图分类号： $852 ． 6 文献标识码： A 文章编号： 1003 — 1278(2006)05 — 0102 — 04

拟态弧菌 (Vibrio mimicus) 隶属弧菌科弧菌属 (Vibri — o) ，革兰氏阴性，不形成荚膜和芽胞，具极生鞭毛，有动力．广泛存在于自然水体环境及水产品中，不仅能引起人类腹泻、中耳炎、外伤感染，而且能导致鱼类、贝类及甲壳类暴发弧菌病 (Vibriosis) ，对人类健康和水产养殖业构成严重威胁。国外学者在对拟态弧菌基本特性研究基础上，又从分子水平研究了拟态弧菌毒力岛及其调控机制；国内对拟态弧菌毒力因子的研究报道很少，而对蟹源拟态弧菌外毒素的生物学特性研究尚未见有报道。

近年来，随着安徽省中华绒螯蟹养殖规模的不断扩大，细菌性疾病时有暴发与流行，其中由拟态弧菌引起的弧菌病是影响养蟹业最为常见、危害较重的一种疾病，严重制约了养蟹业的发展。因此，加深对拟态弧菌生物学特性及其致病机理等方面的研究，对于寻找切实有效的疾病防治措施，振兴水产养殖业具有深远的意义。我们从发病中华绒螯蟹体内分离鉴定到 1 株拟态弧菌 (HX-4 菌株 ) ，并对其致病性进行了初步研究，确定为致病菌。本实验对该菌株外毒素的酶活性、溶血活性、细胞毒性和致死性等生物学特性进行了系统研究，旨在为进一步研究该菌的致病机理和研制毒素疫苗预防弧菌病奠定一定的理论基础。